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凱氏定氮儀如何測定蛋白質
凱氏定氮儀可以檢測和分析食品中蛋白質和氮的含量,在食品質檢部門發(fā)揮著重要的作用。下面為大家簡單介紹一下該儀器是如何進行蛋白質檢測的。
蛋白質是鑒定飼料質量時必測的常規(guī)營養(yǎng)指標。而大部分的飼料廠中的飼料蛋白質的測定一般是使用凱式定氮儀來進行測定的,使用這種方法來進行測定能夠保證測定的準確度,但是測定的時候會花費一定的時間,那么在使用凱氏定氮儀的時候是如何進行測量的,本文就來進行簡單的介紹一下:
1 樣品處理:精密稱取 0.2~2.0g 固體樣品或 2~5g 半固體樣品或吸取 10~20mL液體樣品(約相當氮 30~40mg),移入干燥的 100mL 或 500mL 定氮瓶中,加入 0.2g 硫酸銅,3g 硫酸鉀及20mL硫酸,稍搖勻后于瓶口放一小漏斗,將瓶以45°角斜支于有小孔的石棉網上。小心加熱,待內容物全部炭化,泡沫*停止后,加強火力,并保持質瓶內液體微沸,至液體呈藍綠色澄清透明后,再繼續(xù)加熱 0.5h。取下放冷,小心加 20mL 水。放冷后,移入 100mL容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸按同一方法做試劑空白試驗。
2 按圖裝好定氮裝置,于水蒸氣發(fā)生瓶內裝水至約2/3處,加甲基紅指示液數滴及數毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入數粒玻璃珠以防暴沸, 用調壓器控制,加熱煮沸水蒸氣發(fā)生瓶內的水。
3 向接收瓶內加入 10mL2% 硼酸溶液及混合指示液1滴, 并冷凝管的下端插入液面下,吸取 10.0mL樣品消化稀釋液由小玻杯流入反應室,并以 10mL 水洗滌小燒杯使流入反應室內,塞緊小玻杯的棒狀玻塞。將 10mL40%氫氧化鈉溶液倒入小玻杯,提起玻塞使其緩緩流入反應室,立即將玻塞蓋緊,并加水于小玻杯以防漏氣。夾緊螺旋夾,開始蒸餾。蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內,蒸餾 5min。移動接受瓶,使冷凝管下端離開液面,再蒸餾1min。然后用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶,以 0.05N 硫酸或 0.05N 鹽酸標準溶液滴定至灰色或藍紫色為終點。
凱氏定氮儀對蛋白質的測定可以根據上述的方法進行檢測,為用戶獲取食物質量的詳情的提供重要的數據信息。
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